成人骨髓间充质干细胞诱导分化为神经元样细胞后的维持培养

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篇1：成人骨髓间充质干细胞诱导分化为神经元样细胞后的维持培养

成人骨髓间充质干细胞诱导分化为神经元样细胞后的维持培养

目的:探讨体外诱导成人骨髓间充质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)分化为神经元样细胞后长期培养的可行性.方法:自成人红骨髓分离培养BMSCs,通过克隆培养、成骨分化、成脂肪分化鉴定其特性,取第3代细胞重新接种,经碱性成纤维生长因子预诱导及β-巯基乙醇诱导后,换维持培养液维持培养,观察其分化及生长情况.结果:成神经元诱导分化0.5h后,多数细胞即开始呈现出神经元样外观,5h后绝大多数细胞表现出典型的神经元样外观,维持培养1周后,大多数细胞继续维持神经元样外观,免疫组织化学染色示65%±3.3%的细胞微管相关蛋白-2染色阳性,43%±2.1%的'细胞神经微丝-160染色阳性.结论:成人BMSCs经诱导后半数左右的细胞可分化为神经元样细胞,在优化的培养体系中,分化的神经元样细胞可存活1周以上.

作 者：陈秉耀 侯树勋 祁彦霞 阕海萍 刘少君  作者单位：陈秉耀,侯树勋(解放军总医院第一附属医院骨科,全军骨科研究所,100037,北京市)

祁彦霞(宁夏彭阳县人民医院内科,756500,宁夏彭阳县)

阕海萍,刘少君(军事医学科学院基础医学研究所,100850,北京市)

刊 名：中国脊柱脊髓杂志  ISTIC PKU英文刊名：CHINESE JOURNAL OF SPINE AND SPINAL CORD 年，卷(期)：2006 16(6) 分类号：Q813.1 关键词：骨髓间充质干细胞   诱导分化   神经元样细胞   人  

篇2：成人骨髓间充质干细胞体外培养及诱导分化的研究进展

成人骨髓间充质干细胞体外培养及诱导分化的研究进展

目的. 探讨成人骨髓间充质干细胞体外培养及诱导分化的研究现状及发展前景.方法 查阅国内外公开发表的相关文献,进行分析、归纳、总结.结果 成人骨髓间充质干细胞可在体外大量扩增,并诱导分化为骨细胞、脂肪细胞、心肌细胞等多种组织细胞.结论 成人骨髓间充质干细胞具有成为种子细胞的潜力,在细胞移植方面有广阔前景.

作 者：李亚 赵勇刚 梁萍 LI Ya ZHAO Yong-gang LIANG Ping  作者单位：河南科技大学第一附属医院,河南洛阳,471003 刊 名：河南科技大学学报（医学版） 英文刊名：JOURNAL OF HENAN UNIVERSITY OF SCIENCE & TECHNOLOGY (MEDICAL SCIENCE) 年，卷(期)：2009 27(2) 分类号：Q813.1+1 关键词：成人骨髓间充质干细胞   细胞培养   诱导分化  

篇3：体外诱导骨髓间充质干细胞分化为表皮干细胞

体外诱导骨髓间充质干细胞分化为表皮干细胞

目的:探讨体外诱导骨髓间充质干细胞分化为表皮干细胞的可行性.方法:直接抽取成年健康志愿者骨髓,采用直接贴壁法培养获得较纯的'人骨髓间充质干细胞;用免疫组织化学方法进行表面标志的检测、鉴定及培养扩增后,以HaCaT细胞培养上清液联合表皮生长因子(EGF)诱导分化,透射电镜下观察细胞形态的变化;并运用免疫组织化学方法检测K10,K19及β1整合素的表达.结果:诱导BMSCs1周后可见大量扁平的多角形细胞紧密连接成片,呈铺路石状排列生长,胞浆内可见丰富的角蛋白丝;大量细胞K19和β1整合素双染阳性,个别细胞K10染色阳性.结论:BMSCs在HaCaT细胞培养上清液联合EGF的体外培养条件下可诱导分化为表皮干细胞.

作 者：龙剑虹 刘芳芬 祁敏 LONG Jian-hong LIU Fang-fen QI Min  作者单位：中南大学湘雅医院烧伤整形科,长沙,410008 刊 名：中南大学学报（医学版）  ISTIC PKU英文刊名：JOURNAL OF CENTRAL SOUTH UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES) 年，卷(期)：2006 31(6) 分类号：Q813.11 关键词：骨髓间充质干细胞   细胞分化   表皮干细胞  

篇4：骨髓间充质干细胞诱导分化为心肌细胞的研究进展

骨髓间充质干细胞诱导分化为心肌细胞的研究进展

骨髓间充质干细胞具有自我更新、分化、增殖的和多向分化的潜能.在体内、体外通过各种物理、化学因素可将其诱导分化为心肌细胞.以此来替代坏死的.心肌细胞,改善心脏功能,防治各种缺血性心脏病,减少心肌重构等,具有广阔的临床应用前景.

作 者：邵华 金秀东 SHAO Hua JIN Xiu-dong  作者单位：牡丹江医学院病理生理教研室,黑龙江,牡丹江,157011 刊 名：医学综述  ISTIC英文刊名：MEDICAL RECAPITULATE 年，卷(期)：2008 14(4) 分类号：Q813.5 关键词：骨髓间充质干细胞   诱导   分化   心肌细胞  

篇5：体外诱导人骨髓间充质干细胞分化为软骨细胞的研究

体外诱导人骨髓间充质干细胞分化为软骨细胞的研究

目的:探讨胰岛素样生长因子-I(IGF-I)和软骨细胞培养液体外诱导骨髓间充质干细胞(MSCs)向软骨细胞分化的可能性.方法:采用Percoll分离液分离培养人胚MSCs,体外扩增,用流式细胞仪测定MSCs的CD44、CD71、CD34、CD45表达;在第4代MSCs中加入的'条件培养基进行诱导,根据条件培养基的不同分为4组:①IGF-I组:培养基中加入100ng/mLIGF-I;②软骨细胞培养液组:加入软骨细胞培养液;③联合诱导组:培养液中加入100 ng/mL IGF-I和软骨细胞培养液;④对照组:培养基中不加入IGF-I和软骨细胞培养液.采用倒置显微镜观察、Ⅱ型胶原免疫组化、细胞内蛋白多糖(PG)含量测定等方法判断诱导细胞的形态变化和表达软骨基质的能力.结果:体外培养的MSCs呈现成纤维细胞样形态,流式细胞仪检测结果显示,MSCs阳性表达CD44,阴性表达CD34,CD45;IGF-I和软骨细胞培养液联合诱导15d后,MSCs开始呈现软骨细胞的形态特点,Ⅱ型胶原免疫组化呈阳性,而未诱导的MSCs组呈阴性;联合诱导组细胞内PG含量为8.92μg/ml,显著高于IGF-I组、软骨细胞培养液组和对照组,但低于正常软骨细胞(P＜0.01).结论:IGF-I和软骨细胞培养液能诱导MSCs向软骨细胞分化.

作 者：黄建荣 李建华 李卫平沈慧勇 王志勇 宋卫东 刘尚礼 韩运  作者单位：黄建荣,李卫平,沈慧勇,王志勇,宋卫东,刘尚礼,韩运(中山大学第二附属医院骨科,广州,510120)

李建华(广州医学院生理学教研室,广州,510182)

刊 名：中国临床解剖学杂志  ISTIC PKU英文刊名：CHINESE JOURNAL OF CLINICAL ANATOMY 年，卷(期)：2006 24(6) 分类号：Q343 关键词：骨髓间充质干细胞   胰岛素样生长因子   软骨细胞  

篇6：体外诱导骨髓间充质干细胞向肝细胞样细胞方向分化

体外诱导骨髓间充质干细胞向肝细胞样细胞方向分化

探讨成纤维生长因子-2(FGF-2)在体外定向诱导大鼠骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)向肝细胞样细胞分化的作用及量化关系.体外分离培养大鼠BM-MSCs,将第3代BM-MSCs采用不同剂量的FGF-2诱导.诱导后,在显微镜下观察细胞形态学的改变;用免疫细胞化学法检测白蛋白和CK19的分泌;Shiff染色法检测糖原的分泌.诱导后BM-MSCs由梭形向多角形、卵圆形方向变化,白蛋白、CK19和糖原12 d即有阳性表达,以后随着诱导时间的.延长阳性率逐渐升高.20 ng/mL FGF-2诱导比10 ng/mL FGF-2诱导细胞白蛋白、CK19和糖原的表达量均多.20 ng/mL FGF-2具有较强的诱导BM-MSCs向肝细胞样细胞分化的能力.

作 者：胡晶 牟玲 罗恩杰 HU Jing MU Ling LU En-jie  作者单位：胡晶,罗恩杰,HU Jing,LU En-jie(中国医科大学,病原生物学教研室,辽宁,沈阳,110001)

牟玲,MU Ling(沈阳市传染病医院,辽宁,沈阳,110006)

刊 名：微生物学杂志  ISTIC英文刊名：JOURNAL OF MICROBIOLOGY 年，卷(期)：2008 28(3) 分类号：Q254 关键词：骨髓间充质干细胞   成纤维生长因子-2   肝细胞样细胞  

篇7：大鼠骨髓间充质干细胞体内分化为心肌细胞的相关基因

大鼠骨髓间充质干细胞体内分化为心肌细胞的相关基因

目的研究大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)在体内诱导分化为心肌细胞的过程中相关调控基因的`时序表达,揭示MSCs体内分化为心肌细胞的分子调控机制.方法从大鼠骨髓中分离MSCs并传至第8代,用DAPI标记后注射到正常大鼠心肌组织内,分别于细胞移植后1 d、1、2、3、4、6和8周处死大鼠,在注射点获取心肌标本;采用HE染色观察MSCs植人后的形态变化,荧光免疫组化检测心肌特异性蛋白MHC和connexin43的表达;半定量RT-PCR检测TGF-β、Nkx-2.5、GATA-4、MEF-2 C、TEF-1和RARα等相关调控基因的动态时序表达.结果MSCs注入正常心肌组织后可逐渐向心肌细胞转化,从小圆形未分化细胞逐渐转变为与周围宿主组织连接的心肌样细胞;移植1周后出现MHC的表达,移植4周后宿主心肌细胞与移植细胞间出现connexin43的表达,Nkx-2.5和GATA-4基因诱导后1 d表达开始增强,1周时达高峰,以后维持在高水平,TGF-β、MEF-2 C、TEF-1和RARα基因mRNA在诱导前后无明显变化.结论Nkx-2.5和GATA-4基因在MSCs体内转化为心肌细胞的过程中可能发挥重要作用.

作 者：张文 田杰 吕铁伟 张蕾 江德勤 邓兵 朱静 陈沅 ZHANG Wen TIAN Jie LU Tie-wei ZHANG Lei JIANG De-qin DENG bing ZHU Jing CHEN Yuan  作者单位：张文,田杰,吕铁伟,张蕾,江德勤,陈沅,ZHANG Wen,TIAN Jie,LU Tie-wei,ZHANG Lei,JIANG De-qin,CHEN Yuan(重庆医科大学,儿童医院心内科,四川,重庆,400014)

邓兵,朱静,DENG bing,ZHU Jing(重庆医科大学,儿童医院儿科研究所,四川,重庆,400014)

刊 名：基础医学与临床  ISTIC PKU英文刊名：BASIC & CLINICAL MEDICINE 年，卷(期)：2006 26(1) 分类号：Q813.11 关键词：骨髓间充质干细胞   心肌细胞   分化   调控  

篇8：间充质干细胞分化为心肌样细胞与P120连环蛋白mRNA表达

间充质干细胞分化为心肌样细胞与P120连环蛋白mRNA表达

目的:研究5-氮杂胞苷(5-azacytidine, 5-aza)诱导体外骨髓间充质干细胞(marrow measenchymal stem cells, MSCs)向心肌细胞发展的作用及其机制.方法:从Wistar大鼠骨髓中获得MSCs,培养传代后用不同浓度的5-aza诱导,倒置光显微镜和透射电镜观察诱导前后细胞形态变化;流式细胞术检测细胞周期改变;MTT法检测5-aza对MSCs生长的影响;免疫细胞化学法检测肌红蛋白、结蛋白和肌动蛋白的表达;RT-PCR检测P120连环蛋白1A mRNA的表达.结果:5-aza对MSCs有抑制增殖的作用(P<0.05);在光镜和透射电镜下可见有心肌样细胞的`形态变化;免疫细胞化学检测结果表明,MSCs的经5-aza诱导14d,肌红蛋白、结蛋白和肌动蛋白的表达均较对照组显著增高(P<0.01); PT-PCR结果表明P120连环蛋白mRNA表达明显,而对照组未见表达.结论:MSCs可在体外被5-aza诱导分化成心肌样细胞,这可能与P120连环蛋白1A mRNA表达有关.

作 者：陈莉 买霞 陈小义 徐瑞成 CHEN Li MAI Xia CHEN Xiao-yi XU Rui-cheng  作者单位：中国人民武装警察部队医学院细胞生物学教研室,天津市,300162 刊 名：心血管康复医学杂志  ISTIC英文刊名：CHINESE JOURNAL OF CARDIOVASCULAR REHABILITATION MEDICINE 年，卷(期)：2008 17(3) 分类号：Q95209 关键词：间充质干细胞   肌细胞,心脏   5-氮杂胞苷  

篇9：体外诱导人骨髓间充质干细胞定向肝细胞分化

体外诱导人骨髓间充质干细胞定向肝细胞分化

目的:研究人骨髓间充质干细胞向肝细胞的'诱导分化,为肝组织工程提供理想的细胞来源.方法:以肝细胞生长因子、成纤维细胞生长因子4对种植于基底膜基质中的人骨髓间充质干细胞进行三维立体诱导培养,在培养后不同时间,分别进行形态观察、AFP、Alb的免疫组化荧光染色及靛青绿的摄取与排泌试验.结果:该条件下诱导后的人骨髓间充质干细胞生成肝细胞样细胞,阳性表达肝细胞特有表面标志AFP、Alb,并具备肝细胞特有的摄取与排泌靛青绿的活性功能.结论:肝细胞生长因子、成纤维细胞生长因子4及基底膜基质可能在体外人骨髓间充质干细胞向肝细胞分化的过程中提供适宜的微环境并起重要作用,这为间充质干细胞在肝组织工程中的应用提供了理论与技术上的支持.

作 者：梁峰 王韫芳 岳慧敏 南雪 施双双 闫舫 李荣 裴雪涛 LIANG Feng WANG Yun-fang YUE Hui-min NAN Xu SHI Shuang-shuang YAN Fang LI Rong PEI Xue-tao  作者单位：梁峰,LIANG Feng(军事医学科学院输血医学研究所,干细胞与再生医学研究室,北京,100850;解放军总医院,普通外科研究所,北京,100853)

王韫芳,岳慧敏,南雪,施双双,闫舫,裴雪涛,WANG Yun-fang,YUE Hui-min,NAN Xu,SHI Shuang-shuang,YAN Fang,PEI Xue-tao(军事医学科学院输血医学研究所,干细胞与再生医学研究室,北京,100850)

李荣,LI Rong(解放军总医院,普通外科研究所,北京,100853)

刊 名：军医进修学院学报  ISTIC PKU英文刊名：ACADEMIC JOURNAL OF PLA POSTGRADUATE MEDICAL SCHOOL 年，卷(期)：2006 27(3) 分类号：Q813 关键词：骨髓间充质干细胞   肝细胞   肝细胞生长因子   碱性成纤维细胞生长因子2  

篇10：大鼠骨髓间充质干细胞的分离与培养

大鼠骨髓间充质干细胞的分离与培养

为了确定大鼠骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)体外分离和培养的方法,建立了稳定的MSCs体外培养扩增体系,通过密度梯度离心和贴壁筛选法分离培养大鼠MSCs,观察了细胞的形态,研究了其增殖及生长特征,并应用流式细胞术测定了细胞周期及CD29,CD44,CD45和HLA-DR的.表达.结果表明,在体外培养条件下大鼠MSCs贴壁生长,为成纤维细胞样;CD45和HLA-DR的表达呈阴性,CD29和CD44的表达呈阳性;细胞周期的G0/G1期约占95%,具有原始细胞的特征.说明建立的体外培养扩增体系可获得形态单一、生长稳定、增殖性较强、较均一的大鼠MSCs.

作 者：李延清 刘霞 LI Yan-qing LIU Xia  作者单位：李延清,LI Yan-qing(延安大学,生命科学学院,陕西,延安,716000)

刘霞,LIU Xia(延安大学,生命科学学院,陕西,延安,716000;西北农林科技大学,动物科技学院,陕西,杨凌,712100)

刊 名：西北农林科技大学学报（自然科学版）  ISTIC PKU英文刊名：JOURNAL OF NORTHWEST SCI-TECH UNIVERSITY OF AGRICULTURE AND FORESTRY(NATURAL SCIENCE EDITION) 年，卷(期)：2006 34(5) 分类号：Q813.1+1 关键词：大鼠   骨髓间充质干细胞   细胞形态   细胞周期   密度梯度离心   流式细胞术  

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