苏云金杆菌营养期杀虫蛋白基因vip3A的检测与杀虫活性测定

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篇1：苏云金杆菌营养期杀虫蛋白基因vip3A的检测与杀虫活性测定

苏云金杆菌营养期杀虫蛋白基因vip3A的检测与杀虫活性测定

为获取高活性的野生Bt菌株,对从土壤中分离的99株Bt菌株进行了营养期杀虫蛋白的分子鉴定和生物活性测定.根据已知的vip3A基因序列设计1对特异性引物,进行PCR鉴定, 55株扩增得到1.2 kb的目的片段.对31株阳性菌株的营养期杀虫蛋白活性进行了初步测定,结果显示,Bt LS1和LS8菌株毒力最高,2菌株对2龄甜菜夜蛾的.体重抑制率分别为91.14%和93.59%.选取Bt LS1和LS8菌株进行胞内外营养期蛋白杀虫活性测定,发现Bt LS1和LS8菌株对初孵甜菜夜蛾体重抑制率分别为45.1%和43.2%,对初孵棉铃虫的校正死亡率分别为(22.1±1.4)%和(55.3±3.7)%,对2龄棉铃虫的体重抑制率分别为(78.7±6.6)%和(50.4±2.4)%.

作 者：郝会海 朱美秋 宋萍 陆秀君 杜克久 HAO Hui-hai ZHU Mei-qiu SONG Ping LU Xiu-jun DU Ke-jiu  作者单位：郝会海,朱美秋,杜克久,HAO Hui-hai,ZHU Mei-qiu,DU Ke-jiu(河北农业大学,林学院,河北,保定,071001)

宋萍,陆秀君,SONG Ping,LU Xiu-jun(河北农业大学,植保学院,河北,保定,071001)

刊 名：河北农业大学学报  ISTIC PKU英文刊名：JOURNAL OF AGRICULTURAL UNIVERSITY OF HEBEI 年，卷(期)：2006 29(6) 分类号：S476 关键词：苏云金杆菌   vip3A基因检测   棉铃虫   甜菜夜蛾  

篇2：苏云金杆菌晶体蛋白Cyt1A对营养期杀虫蛋白Vip3A杀虫毒力的影响

苏云金杆菌晶体蛋白Cyt1A对营养期杀虫蛋白Vip3A杀虫毒力的影响

为检测苏云金杆菌晶体蛋白Cyt1A对Vip3A表达和杀虫活性的影响,将p20和cyt1A基因与vip3A基因连接构建了重组质粒pHVC20,然后电激转化至苏云金杆菌无晶体突变株CryB中进行了共表达,以单独表达Vip3A蛋白的CryB(pHPT3)作为对照菌株.Westem blot结果显示,Vip3A蛋白在CryB(pHVC20)菌株中的最大表达量约为在CryB(pHPT3)菌株的2倍,这可能是由于前者中的辅助蛋白P20增加了Vip3A表达量的.缘故,晶体蛋白Cyt1A的存在对Vip3A的正常表达没有影响.生物测定结果表明,CryB(pHVC20)和CryB(pHPT3)菌株对斜纹夜蛾初孵幼虫的LC50值分别为10.62 μg/ml和78 μg/ml,前者的毒力比后者提高了6倍,这表明Cyt1A蛋白和Vip3A蛋白对目标昆虫的毒力可能存在着协同增效作用.

作 者：师永霞 马文丽 袁美妗 陈建武 庞义 SHI Yong-xia MA Wen-li YUAN Mei-jin CHEN Jian-wu PANG Yi  作者单位：师永霞,SHI Yong-xia(中山大学生物防治国家重点实验室,广州,510275;南方医科大学基因工程研究所,广州,510515)

马文丽,MA Wen-li(南方医科大学基因工程研究所,广州,510515)

袁美妗,陈建武,庞义,YUAN Mei-jin,CHEN Jian-wu,PANG Yi(中山大学生物防治国家重点实验室,广州,510275)

刊 名：科技导报  ISTIC PKU英文刊名：SCIENCE & TECHNOLOGY REVIEW 年，卷(期)：2006 24(4) 分类号：Q786 关键词：苏云金杆菌   晶体蛋白Cyt1A   营养期杀虫蛋白Vip3A   生物测定  

篇3：转蜘蛛杀虫肽与Bt毒蛋白C肽基因小黑杨对杨扇舟蛾的抗性

转蜘蛛杀虫肽与Bt毒蛋白C肽基因小黑杨对杨扇舟蛾的抗性

为评价转蜘蛛杀虫肽与Bt毒蛋白C肽融合蛋白基因小黑杨对杨扇舟蛾Clostera anachoreta(Fabricius)的抗性,采用苗木套笼饲喂法和石蜡切片法,对取食转基因小黑杨的杨扇舟蛾幼虫的发育、死亡情况和中肠结构进行了研究.结果表明,杨扇舟蛾幼虫分别取食TT3(转基因无性系3)、TT1(转基因无性系1)和CK(非转基因对照)小黑杨后总历期依次为35.63天、30.39天和28.74天,幼虫化蛹率依次为12.1%、29.3%和44.3%,平均蛹重依次为0.1077g、0.1714 g和0.1893 g.转基因小黑杨能明显延长杨扇舟蛾幼虫的.发育历期,降低化蛹率和蛹重.同时,转基因小黑杨有抑制幼虫蜕皮、增加其死亡率和致蛹畸形的作用,且能破坏幼虫中肠,使中肠细胞排列松散、肠腔食物减少、中肠变形,其破坏作用随时间延长而加剧.一般来讲,TT3对杨扇舟蛾的各种影响作用均大于TT1.

作 者：范海娟 胡春祥 王志英 刘桂丰 FAN Hai-Juan HU Chun-Xiang WANG Zhi-Ying LIU Gui-Feng  作者单位：东北林业大学林学院,哈尔滨,150040 刊 名：昆虫学报  ISTIC PKU英文刊名：ACTA ENTOMOLOGICA SINICA 年，卷(期)：2006 49(5) 分类号：Q965.9 关键词：小黑杨   蜘蛛杀虫肽   Bt   杨扇舟蛾   抗性  

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