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篇1：牙鲆弹状病毒环介导等温扩增检测方法的建立与应用
牙鲆弹状病毒环介导等温扩增检测方法的建立与应用
建立了牙鲆弹状病毒的环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测方法,首先根据牙鲆弹状病毒的糖蛋白的.基因保守序列,利用Primer Explorer V3软件设计了6条引物,并对LAMP反应温度和反应时间等条件进行了优化.该方法的检测限为30 fg RNA,比常规RT-PCR灵敏度高100倍,与鲤春血症病毒、传染性胰脏坏死病毒、传染性造血器官坏死病毒、海洋双 RNA 病毒、病毒性出血败血症病毒以及病毒性神经坏死病毒等没有交叉反应.该方法检测时间短,在1 h内即可完成检测.用建立的LAMP方法对临床鱼样进行了检测,结果表明40尾石鲽鱼样品中有3尾感染HRV,与病毒分离结果一致,说明LAMP方法比较适合牙鲆弹状病毒的早期及现场诊断.
作 者：孙颖杰 岳志芹 刘荭 赵玉然 史秀杰 梁成珠 吴斌 李叶 王哲 SUN Ying-jie YUE Zhi-qin LIU Hong ZHAO Yu-ran SHI Xiu-jie LIANG Cheng-zhu WU Bin LI Ye WANG Zhe 作者单位：孙颖杰,SUN Ying-jie(吉林大学畜牧兽医学院,长春,130062;辽宁出入境检验检疫局,大连,116001)岳志芹,赵玉然,梁成珠,YUE Zhi-qin,ZHAO Yu-ran,LIANG Cheng-zhu(山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心,青岛,266002)
刘荭,史秀杰,LIU Hong,SHI Xiu-jie(深圳出入境检验检疫局,深圳,518001)
吴斌,李叶,WU Bin,LI Ye(辽宁出入境检验检疫局,大连,116001)
王哲,WANG Zhe(吉林大学畜牧兽医学院,长春,130062)
刊 名：华中农业大学学报 ISTIC PKU英文刊名：JOURNAL OF HUAZHONG AGRICULTURAL UNIVERSITY 年，卷(期)：2010 29(2) 分类号：Q937.47 关键词：牙鲆弹状病毒 环介导等温扩增 聚合酶链式反应 检测 hirame rhabdovirus(HRV) loop-mediated isothermal amplification(LAMP) RT-PCR detection篇2：H1N1猪流感病毒环介导等温扩增快速检测方法的建立
H1N1猪流感病毒环介导等温扩增快速检测方法的建立
目的.:建立H1N1猪流感病毒环介导等温扩增(LAMP)快速检测方法.方法:从GenBank中获得H1N1猪流感病毒血凝素(HA)、神经氨酸酶(NA)基因序列,应用DNAStar软件MegAlign程序分析其序列,利用Primer Explorer V4软件在序列保守区域设计LAMP引物,即外引物和内引物,同时以H1N1猪流感病毒的cDNA作为阳性模板,对试验中的几个反应条件进行优化.结果:LAMP检测方法对H1N1猪流感病毒的灵敏度达到4～6个拷贝,其引物对于H9亚型禽流感病毒、猪瘟病毒和猪圆环病毒均无非特异性扩增,表现出良好的特异性.结论:建立的H1N1猪流感病毒环介导等温扩增快速检测方法灵敏度高、特异性强、重复性好,为快速检测猪流感病毒提供了新方法和新思路.
作 者：苏霞 杨兵 周宏专 曾作财 孙继国 赵景义 马志军 孙丹丹 陈小玲 作者单位：苏霞,孙丹丹(河北农业大学动物科技学院,河北保定,071000;北京市农林科学院畜牧兽医研究所,北京,100097)杨兵,周宏专,曾作财,陈小玲(北京市农林科学院畜牧兽医研究所,北京,100097)
孙继国(河北农业大学动物科技学院,河北保定,071000)
赵景义,马志军(北京市畜牧兽医总站,北京,100029)
刊 名：中国动物检疫 PKU英文刊名：CHINESE JOURNAL OF ANIMAL HEALTH INSPECTION 年，卷(期)：2010 “”(5) 分类号：S852.659.5 关键词：H1N1猪流感病毒 环介导等温扩增 条件优化牙鲆弹状病毒环介导等温扩增检测方法的建立与应用（合集2篇）
