“灵罗娃娃莱”通过精心收集，向本站投稿了9篇小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的分离、培养和鉴定，下面是小编给大家带来关于小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的分离、培养和鉴定，一起来看看吧，希望对您有所帮助。
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篇1：小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的分离、培养和鉴定
小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的分离、培养和鉴定
目的:建立一套可靠的小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞(AEC Ⅱ)分离、纯化和培养技术, 为进一步研究小鼠支气管肺泡干细胞(BASC)的增殖、分化及其在肺腺癌发生中的作用奠定基础.方法:采用分散酶消化小鼠肺组织块,经免疫黏附法纯化小鼠AEC Ⅱ,并进行原代培养.用SP-C和CCSP免疫荧光染色和透射电镜对所分离的细胞进行鉴定.结果:该方法所获得细胞产量大、纯度高.AEC Ⅱ比例约为(80±2.6)%(n=5),Clara细胞约(6.7±1.2)%(n=5),并能维持培养3～5 d.透射电镜观察AEC Ⅱ,细胞内可见板层小体.结论:该方法是一种可靠的`小鼠AEC Ⅱ的分离、纯化和培养技术,可满足一般的实验要求.
作 者：安江洪 钱莘 敖绪军 卓文磊 陈正堂 AN Jiang-hong QIAN Shen AO Xu-jun ZHUO Wen-lei CHEN Zheng-tang 作者单位：第三军医大学附属新桥医院解放军肿瘤研究所,重庆,400037 刊 名：医学研究生学报 ISTIC英文刊名：JOURNAL OF MEDICAL POSTGRADUATES 年，卷(期)：2008 21(3) 分类号：Q813.1 关键词：肺泡Ⅱ型上皮细胞 原代细胞培养 小鼠支气管肺泡干细胞篇2：小鼠腹腔巨噬细胞的分离培养与鉴定
小鼠腹腔巨噬细胞的分离培养与鉴定
目的:建立一种简便的巨噬细胞分离与培养方法, 为骨替代材料降解产物的'研究提供巨噬细胞.方法:以无血清DMEM培养液灌洗小鼠腹腔,10 min后吸出灌洗液于含10%胎牛血清的DMEM培养液中培养.采用HE染色和倒置显微镜观察细胞形态;酸性磷酸酶及非特异性酯酶染色测定细胞内酶的表达;墨汁颗粒吞噬实验检测其吞噬功能.结果:获得高纯度的巨噬细胞,具有巨噬细胞的形态特征,良好的吞噬功能,含水解酶类.结论:本法是一种简易而实用的体外分离培养腹腔巨噬细胞的方法.
作 者：尹美珍 李世普 袁琳 戴红莲 YIN Meizhen LI Shipu YUAN Lin DAI Honglian 作者单位：武汉理工大学生物材料与工程研究中心,武汉,430070 刊 名：武汉大学学报（医学版） ISTIC PKU英文刊名：MEDICAL JOURNAL OF WUHAN UNIVERSITY 年，卷(期)：2006 27(2) 分类号：Q813.1+1 关键词：巨噬细胞 分离培养 鉴定 小鼠篇3：山羊子宫内膜腺上皮细胞的分离培养和鉴定
山羊子宫内膜腺上皮细胞的分离培养和鉴定
为了探讨山羊子宫内膜腺上皮细胞的`分离、生长条件以及纯度鉴定,通过2 g/L的Ⅰ型胶原酶置于水浴消化4 h,200目的滤网过滤后进行低速离心,收集沉淀物,沉降洗涤3～5次,将细胞移至24孔培养板置37℃细胞培养箱中进行培养.12 h后开始贴壁生长,腺团开始向外部扩散,生长2～3 d,细胞扩散并出现明显的铺路石状,4～5 d腺团基本扩散开来并呈一定走向继续生长.经免疫组织化学方法进行细胞染色,细胞表达角蛋白的阳性率达90%以上.
作 者：丰艳妮 吴庆侠 吴瑞 楚元奎 靳亚平FENG Yan-ni WU Qing-xia WU Rui CHU Yuan-kui JIN Ya-ping 作者单位：农业部家畜生殖内分泌与胚胎工程重点开放实验室,西北农林科技大学动物科技学院,陕西杨凌,712100 刊 名：西北农业学报 ISTIC PKU英文刊名：ACTA AGRICULTURAE BOREALI-OCCIDENTALIS SINICA 年，卷(期)：2006 15(6) 分类号：S827 关键词：子宫内膜 腺上皮细胞 免疫组织化学 鉴定篇4：-C57胚胎小鼠神经干细胞的分离、培养与鉴定
广东学药学院
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篇5：-C57胚胎小鼠神经干细胞的分离、培养与鉴定
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剑（
1 广．药学院东中医药研 究 / 广东省院代性谢病疾中医防治药重实点室验 ，家国中医药理 局管脂高血调肝降脂症重研点究室/ 国家中 药管理医局代谢脂级实三室验 ，东 广广 5州10006 ；．2中 大学山生 科命学院干学胞研究细室 ，广 广州东510 006） 培
养神经干胞细（NSCs ） 并，对其行进鉴定方。 采法用动手法胰蛋白酶消化及 法摘： 要的 体外分目离 分离、鼠脑细胞胎，用 化的无优血清NS C 培s养基行进养培。细胞疫免光荧检法测N CSs特异 性标记子 3 d分左 获右得大未分量化巢呈悬浮状生的长 表的达结。果分 离脑的细体胞培外养48 h已 部分大壁贴 神，经干胞细团第 3 代时，。 少很见到贴细壁胞 ，几乎是神全球，经神经球 周围在存较多刺微。 细 表胞 达一中种间丝蛋白，即巢蛋 白（nes ti）n 。论结成功 分、离鉴定 出C57小鼠 NSsC，并 在体外可件条进下行传 扩增培代养。 关键词：C 57 胎小胚；鼠 经干细胞；神 胞细培；养 蛋巢白 中分图类： 号R392 文献志标码 A：d i： 10．o396 9 j/．sin．1s060873．8214003．0．22878 （3 214）0 00354340 章文编号 ：0016
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laoion，t culurtean d iedtifnciaitnoo f eunalrste mcel sl rfmoC5 e7bmyorin mccieW
N Ai1L， IYHual n2 ，iBEI W iejia1n 1．（uGnagdogn TMCKey L abratory ofroM taboelc iisDaees，s Ky eLbarotorayo Modfluaintg Lievrt oTrat HepeyripemlaiS ATM， anC Ldeev 3l Labraotroyo f Liid Mpteboaism SAlTM，CIn stiute oftChinese edMciinla Sicneec，GsuagnongdPha racemtucail UinvesrtyiGuan，gzohu5 1006，0hCin；a 2．St m eCle Rlseeacrh Depratmne，t choSlo o fifL Sceeicens， uS nYtasn Ueinersivyt， Guagnzhou， 50006，1China） bsArtatc： Obejtivc Toei slotae cu，turl aned deitnfiy hte eunarlste m cllse（ SCN ）s． Meth od NSsCs for mftal eimce ewe irsloteda bydi sesticon ad nnzeyatmi dcgiestoin a，n ductlrude ni he opttima slreufreem SCN mdeimu． he Tpesifcicb ioamker orf SNC wssa deteted by cmiumnocyotluoresfect assan．y esuRlst hTe islatedo NSsC dahree dt oth ceutlru elpta ewihit n48 ， and hnstelik clesuetr ofsN CS weresobta iednin th eulcturesus pnseoinin abo u t 3．dOn te 3hth asspgea sf NoSC， asherend cetlsla re arelyrseen， a nd nealryal l erwene rusohperesw th spiinlu． eNsten wasi exprssee idnt ehc ulutrd ceels． ClncoulisnoN CS sar secucesfuslyl silaoted an dcutlreu dfomr fetl Ca75mi ec ，adnc olud polifrertae nivitro ． eyKwo rsd C：57 mbeyoricn mci；e nerul stea cemll；s cel cluturel；nest i
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NCSs） 具分有化 为经干细胞 神（ne uarstemlcle，l神经元 、星 形质胶细胞少和胶突质细的能胞 ，力能自 。 更我新，并足 提以供量大
脑组细胞织细的群 ， ， 胞SCsN现 发已现 多种型类的中神经系枢损统后伤 激活并被利于有组的损织伤修和功能复复恢 。因
400 收2日稿：期2 01［421
］此，
研 究NS Cs 的物学生于对神经统损系修复伤 和34［ ］。临 床用中应，退 行病变的性疗治具重有意义 要NSsC的 来源数量和限是有前存目在的主要题问。N Ss C体的培养外和增对扩实于其现在潜价值 此， ［因65 ］。SCs N的体获外取可过直接通 具有从重要用作
金项目：基广东 省育部产学教研结项目（合 202109B1011039 ） ；州广科技市计助划项目资（1 1C21307338） 3359607，2Em al： 107i515171@9qq ．c m； o通信作 要从事中主药药理究研 电，： 02话0作简介：者 万丽 198（8― ），女， 士研硕究生 ，maiE：l biwje200@ a0iyun．lco。m者 贝伟：剑（1 69―） 3，研究 ， 主员要事中从药理研究和新药研发， 药男 博，士 ，051 9：6 55 络网版出间：时2 140网出版络地址 ht：pt / ： www．/nkcine．t/ cmk / details 4/．4141．3R20．4051160．55．091．htm0l
3期第
等 ．C57
篇6：-C57胚胎小鼠神经干细胞的分离、培养与鉴定
万3
55
神
经组分织离培、养 他来其源细干的胞诱分导、永化 主要过悬通浮长生贴和生 的 化SNCs3 种 径实途，现 壁 培 养2种 方 式进 行体 外 扩 增。 悬 浮 神经 球 （n uersphero aessya， SN A）是 N CS 体外s培养最中常 用的方，式该 基于 N法SsC 在外无体血清培养中 基可依有丝赖裂原分的系维、悬浮成球 生长、维 自持我
［7］ 更 新和分未化态的状特发点建立展来 起 。尽管神 球经法对相简易单，行 不同验室提实出各自的操
开腹腔
，露两侧暴子，宫用 科眼镊住钳宫头子端 ， 顺宫分离至子宫角子剪下处，放入有冰 PS B溶液培养皿 ，中 依次去子宫壁除和膜，胎 细仔分离得到组脑织 ， 手动得法到胎鼠脑细。胞冰 D的MM /EF12 洗 涤1遍 ，加 入0．1% （ 0 φ ）的胰蛋酶白， 在恒培温摇床 养MDEM/ F21 终消化。 用止 010上 37 ℃消化 30 min， 1 00 0 r /mni 目筛子，过滤 收，集于心离中，管离 心3 imn，去 上，清加入已 配制的 好NCS 培养基s（ 含NCsS 2 B27、%0 2gn/ L EGF、20m g n /m 基 L 础培 养、基FGFb）制 成单胞悬细液 细，计数胞后， 之加 入6孔 板 。 3 1。中原 培代 养每 换天 次 1液．．22C 5 胚7 胎小 鼠NSCs 的培养 和纯 化 相差 显在镜微每下观察天鼠小 SCsN 的贴壁悬及、浮生长
作程序
但 ，NSCs 培养对件条和作技术操求要高， 不同发育较段脑组织阶的择、细选胞分消化和接种离 代方传式 、培基成分等细节的养变都会影改 NS响C 的s培养果，结 因而如何得获稳、体定增外能力殖和 低度成球密力强、能能 反复传代的 N够Cs 是 NSCsS研
［8 究］的基本问 题 本研究。从定特育阶发脑段织 获取细胞组 通过分，离培方养的不法优化断， 立从 建2．5 1d C57 的孕胚胎鼠脑分中离养培NSCs 方的法。
情
和况形变化。态 待细生胞密度达长 ＞ 80%到长 满 时， 贴壁对分部和浮部分分悬用别0．12 % 5的蛋胰白 消化 3 酶inm， 开分培，养至第 代 3 P3（ ，） 可以到 较纯且活得较性好的神干细经胞球。1． ．2 13．．321． 5C 胚7胎鼠的小 SNs 的鉴定 C光观察镜 倒置微镜显下察不观同间点 时神经细胞和干经神球的形态
。
11．
1
料与材方法材料
试剂
．11．
1NSCs 基培础养 （ 基山中学生大科 干院细胞 中 心张 雁教 授 惠 赠） ； B27（ Gi co 公b司 ） ； FbF （ GroSPecpaTnyT echoGenn eLt． 公d司 ）； EF （ GPrSopecTna yTehcnoeGenLtd． 公 司 ） ； 胰 蛋白 酶、
1
．2．32
N．CS s 志标 蛋 n白sten 表 达i 的 检测 将P 神3经转移至用球 L聚多氨酸包被赖盖的片玻， 养
培DME
/M 1F（2 Hylcoen公司 ）； PB S、4% L多赖聚酸、氨 （ ）φ的 聚多甲、醛 riTonX100 t （国鼎物技术生有限公司 ）； 山羊清血 博奥森（生技物术限有公 ）司； 兔抗 巢蛋（ n白etsn） i克多抗隆（体美国 S nata ruzC公 ）司； 抗羊兔 Dy lgith94 （5 aErthx o）； Hocehs33t58、2片液 （封Be yotime公 ）司。 1．1． 2主仪要器 高速冷冻离心机（ 德国Ep pndore ）f ； 水式 套CO2 养培（ 美箱国Shel La 公司 b） ； 荧倒光置 微镜（显 国 德eZsi s司公） 倒；相置差显镜 微 日（本O ylmusp公 司 ；）B T224S 分 天析平［赛 多 利 斯 Sa（troiru）s 科学仪 （器北 京） 有限 司 公］； P UERLAB PURLAEBU LTARG EM K 超2 Option纯7S 纯机水 、5 全0自 高 压动消 毒 水锅机 ELGA ）（； HV E H（rayiaam） ； CB499WDX冰 箱 （Haer ）i ；HT10Z3B 恒培养摇温床（上 一恒科学海仪有限器公司 ） 。．1．2 1实动物验C5 7B /L 6小鼠， 18 0，d雌 ，性 自 购中山学大实验动中心， 生物产可许证号SC KX（ 粤 201）10029 。．2 1法方 1．2． C157 胎小鼠胚 SNC 的.s离 分孕将 21． 5 d的 57C 鼠断颈处孕， 用死酒精消毒后， 之腹沿正中线
［9打］
至胞大细分部贴壁 。去弃胞培细液，养用 PBS 洗 3 。遍 加4%多 聚甲醛定 固3 m0in ，加PBS 冲洗 5 mi n× 3 ；0． 2%T irtxo10 0室温 膜破1 0inm，P S 洗 B涤5 mi n 3； ×5 %的羊山血室温封清 闭03mi n P，SB 涤洗 5 mn × 3；i 一 抗 nestn i 1 （ 5∶0 ）4 ℃孵 育过 夜 、抗二 yDLiht g945A ffiniPur Goat enAtiRabbit gIG （ +HL ）（ ∶11 00） 室 温 避 光 孵 l h， 育oeHcsh33t52 （ 18μg m/）L室温 避光复核染15 m ni，P SB冲洗 2 遍， 封片，显微镜 察观
。2
2．
1结果
57C 胚小胎鼠 SCNs 的离、分 培与纯化
养分 离
得到 的 5C 7 胚 小 鼠胎 的NSsC 镜光 下 见， 原代细可接种后，胞部分 细胞渐逐降沉贴附于6 孔板 面，表 体较小， 有光胞晕 ，悬部浮可分看到以亮很 圆的形细组成的细胞胞。团第 2以后天看可到细 胞大分贴部壁 ，悬浮细胞较亮且较， 很圆多细团块胞 。成辐 射状贴壁长 生浮部分可悬看到一以些十几个 由细组成的桑葚胞神经状球小浮生长 悬 如图 1A。 接，种 3第天 之后， 经小球直神径逐渐增大 贴，的壁胞细 块颜色逐团渐变暗原。代养中可见培神经球围周无明 显刺突 ，在明显存胞聚集细，如图 1B 。
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广东
学院药学
报
30第卷
3
讨
论NSCs有自 我更新倾向能在体外培并养件下条
“神经球
， ”成 形可其能为枢神中系统损经伤脑缺 如血 缺、、氧 颅脑伤的神经修复外提供策略新多。年 来研者们究直一寻求用细胞进干行胞替代治细 ，疗
治． A代原 第2天 B．； 代第原3 天。 1 图原神经干细代球胞 100（ ）×Pri mry naerualst e mcles lspeherF gurie1
中疗神枢经系统神的功经能陷缺疾病， 如外伤 肿瘤 、除切术功能障碍后 、中、风 经神化退疾病性老年如痴 症呆 帕、森金、病多发性硬化
［1等10 ］
。
4原代以材神经取球培养 NS法C 的s势优在能 于原将代胞细壁部分传代， 第贴3 天显 镜微观 察，下 见细胞可有一些贴壁，而 也有且较多神的球经悬 生浮。长经球形神较原状规代则 ，央色淡中 无明， 显沉暗 如，图 2 。 P将 1代细胞悬的部浮分代， 传第3天观 察，现 与 P象 代1类似， 是贴只细胞更少壁。P 2代细胞继传续，代第 3 观天，察可 到神经见球第 较 代2，小而数目 显增多，明 光折更强， 性且状形加更规则， 少见到贴壁细胞。神很经球周存围较在多刺微 表，传代明 后SCNs 同的性增加，质 处活跃的增于殖 状。如态 3。 较图保好持胞原细有生物的学性特 ，体与内神发经 生有好的良关性， 相又能分为化不同特的神性细胞， 经有能反效正映生理常过程干预和素因的作用， 有助 分于析 SNCs 增的殖 自、更我能力和多向新化能分 NSC 研s为究神发经育程过提了良供好的 。因力，此 型模。统传鼠大NS s 的体C培外养多采 D用EMM/ F1 2和 2N/ B 27基础 养基，培 辅一定以浓度 的bGF 和F / 或E G。F该培养在中 基SCs 必N以较高须密 度种才能接成，球 可不免地导致避了过的多经球聚 神，集影响 胞正细常生学特物的观察，性 不合 N适Ss 自C更新的研究。我 本研使用究的鼠 大SCsN 殖基 础培养增，基 是在统 DM传EM/ F21 和N2 / 2B7 基上 础改的进优化配方。 本研 表 明，究从 孕1．25 d 的 C 57 小 中 分鼠 离NSsC， 采手动法和酶用消法分化 离NSs， C及优化以
A无．第
1 代经神干胞细（ 01×0 ；）B． 第 代神经3干细胞 10（× 0 ；） C． 第 3代神 干经细胞 （200× ）。图2 代传神干细胞经Su cbltuur efo nuerlas te cmells iFgure2
血清
培基， 获养的 N得SCs 力活和产出率， 有高强较的增殖 力能， 后为神经再续的生验研实和究枢中经神系统疾 新药研病提供良好发了实的模验型基础。
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r2．2
神
经细干标志胞蛋 ne白tsi n达表检的 测3 代神经P贴壁后球， 免荧光疫学化染发色，现神
经球细 中间胞丝蛋白n stei 表n达阳性，呈胞浆着 色，同 样， 核染 料H eocsth33285将 细核着胞，色 图 如3 示所
图3
。神
干细胞经标志物n setni的 达表（ 040 × ，细 免胞荧 光疫）法 xprEesson of inetsi nsat h NSCs markere（ 004 ×
，cells
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第期
篇7：-C57胚胎小鼠神经干细胞的分离、培养与鉴定
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编任:辑 幸建)华
篇8：小鼠腹腔巨噬细胞的分离与培养
小鼠腹腔巨噬细胞的分离与培养
目的:建立一种小鼠腹腔巨噬细胞分离的简便方法,为低强度激光照射对巨噬细胞功能的影响研究提供实验细胞.方法:以无血清的RPMI-1640培养液灌洗小鼠腹腔,分离获取小鼠腹腔巨噬细胞,在含10%小牛血清的RPMI-1640培养液中培养.采用倒置显微镜观察细胞形态,台盼蓝染色计算存活率,瑞氏染色计算纯度.结果:获得高纯度的'巨噬细胞,具备巨噬细胞的形态特征.结论:本法是一种简便实用的分离小鼠腹腔巨噬细胞的方法.
作 者：李海涛 肖丹 屈学民 刘渊声 马长升 杨继庆 LI Hai-tao XIAO Dan QU Xue-min LI UYuan-sheng MA Chang-sheng YANG Ji-qing 作者单位：李海涛,屈学民,刘渊声,马长升,杨继庆,LI Hai-tao,QU Xue-min,LI UYuan-sheng,MA Chang-sheng,YANG Ji-qing(第四军医大学生物医学工程系,陕西,西安,710032)肖丹,XIAO Dan(第四军医大学军事预防医学系,陕西,西安,710032)
刊 名：现代生物医学进展 ISTIC英文刊名：PROGRESS IN MODERN BIOMEDICINE 年，卷(期)：2008 8(4) 分类号：Q813 关键词：小鼠 巨噬细胞 分离篇9：孕鼠子宫内膜上皮细胞分离、培养及活力检测
孕鼠子宫内膜上皮细胞分离、培养及活力检测
为探讨昆白系孕鼠子宫内膜上皮细胞的分离与体外培养条件、生长特点及其增殖规律,采用2.5 mg/mL胰蛋白酶+0.4 mg/mLEDTA分别以20,30,40 min消化子宫内膜,结合刮取法,对昆白系孕鼠子宫内膜上皮细胞的分离培养进行了研究.结果表明,随着消化时间的增加,所获得的细胞数目也增多,但细胞活力下降(噻唑兰法检测);消化30 min所获得的'细胞活力高、数目多,细胞比较单一;子宫内膜上皮细胞的活力随着细胞培养代数的增加而下降.
作 者：何志全 沈文正 窦忠英 HE Zhi-quan SHEN Wen-zheng DOU Zhong-ying 作者单位：西北农林科技大学,国家干细胞工程技术研究中心陕西分中心,陕西,杨凌,712100 刊 名：西北农林科技大学学报（自然科学版） ISTIC PKU英文刊名：JOURNAL OF NORTHWEST SCI-TECH UNIVERSITY OF AGRICULTURE AND FORESTRY(NATURAL SCIENCE EDITION) 年，卷(期)：2006 34(2) 分类号：Q813.1+1 关键词：子宫内膜 上皮细胞 噻唑兰 活力检测 孕鼠★ 职责分离
★ 分离500字作文
小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的分离、培养和鉴定（集锦9篇）
