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篇1：体外分离培养小鼠胃Cajal间质细胞的实验方法研究
体外分离培养小鼠胃Cajal间质细胞的实验方法研究
目的 对KM小鼠胃Cajal间质细胞进行体外分离、培养,并对其进行鉴定,摸索高效实用的方法,为进一步探索研究Cajal间质细胞的移植、替代治疗及药物实验提供基础.方法 以KM株小鼠胃为组织来源,体外分离、培养ICC,并进行细胞传代,光镜下观察其形态,用荧光标记C-Kit特异性抗体标记细胞,进行免疫组化鉴定.结果 细胞稳定贴壁后,形成梭形或三角形突起,3 d后可出现长突起,并可逐渐形成网络连接.结论 酶解法分离细胞成功,但纯度低,数量不足;体外培养ICC 24 h后逐渐稳定贴壁,3 d以后可形成网络连接,可稳定培养3周以上;传代后细胞正常形态逐渐发生变化,20 d后可逐渐凋亡.
作 者：柳利明 农晰婷 秦榕 路明亮 黄华 作者单位：昆明医学院第二附属医院消化内科,云南,昆明,650101 刊 名：昆明医学院学报 ISTIC英文刊名：JOURNAL OF KUNMING MEDICAL UNIVERSITY 年，卷(期)： 31(3) 分类号：Q813.1+1 关键词：小鼠 胃 Cajal间质细胞篇2：豚鼠膀胱Cajal样间质细胞的分离、培养及其鉴定
豚鼠膀胱Cajal样间质细胞的分离、培养及其鉴定
目的` 探索豚鼠膀胱Cajal样问质细胞的原代培养方法.方法 颈部脱臼法处死豚鼠,无菌条件下分离出膀胱肌组织制备成肌条.采用V型胶原酶酶解法分离细胞,将细胞悬液接种于含干细胞因子的细胞培养基中培养,隔日换液.用酪氨酸蛋白激酶受体特异性抗体标记细胞,证实细胞类型.结果 培养后的Cajal样间质细胞保持其固有特征,可见胞体为梭形且胞体两极有两个细长突起,该类细胞酪氨酸蛋白激酶受体抗体荧光染色阳性证实细胞培养成功.结论 用V型胶原酶消化法可获得成年豚鼠膀胱Cajal样问质细胞,并在体外条件下生长,可用于Cajal样间质细胞的电生理学研究.
作 者：Wang Qian 王勤章 Ding Guofu 李维仁 Wang Wenxiao 王江平Li Yinglong Wang Qian Wang Qinzhang Ding Guofu Li Weiren Wang Wenxiao Wang Jiangping Li Yinglong 作者单位：新疆石河子大学医学院一附院泌尿外科,新疆石河子,83 刊 名：现代泌尿外科杂志 ISTIC英文刊名：JOURNAL OF MODERN UROLOGY 年，卷(期)：2008 13(4) 分类号：Q813.11 关键词：干细胞因子 V型胶原酶 酪氨酸蛋白激酶受体 Cajal样间质细胞篇3：昆明白小鼠胚胎干细胞分离与体外培养
昆明白小鼠胚胎干细胞分离与体外培养
为探索昆明白小鼠胚胎干细胞建系方法,将受孕4.5天的`昆明白小鼠囊胚用免疫手术法去除滋胚层,然后将内细胞团(ICM)接种于胎鼠成纤维细胞饲养层上培养,形成的胚胎干细胞样集落用胰蛋白酶-EDTA消化法传代,培养后进行相差显微镜观察及碱性磷酸酶染色.结果饲养层上生长的ICM细胞呈典型的ES样细胞集落,传至第8代碱性磷酸酶染色呈强阳性.实验表明免疫手术法适用于昆明白小鼠ES细胞建系,获得的细胞集落具有ES细胞的主要生物学性状.
作 者：李煜 梁琳 王振飞 贾瑞贞 戴宝贞 李瑶 Yu Li Lin Liang Zhen-Fei Wang Rui-Zhen Jia Bao-Zhen Dai Yao Li 作者单位：内蒙古大学哺乳动物生殖生物学与生物技术教育部重点实验室,呼和浩特,010021 刊 名：细胞生物学杂志 ISTIC英文刊名：CHINESE JOURNAL OF CELL BIOLOGY 年，卷(期)： 29(6) 分类号：Q2 关键词：小鼠 胚胎干细胞 免疫手术 内细胞团篇4：新生小鼠子宫内膜上皮层体外分离研究
新生小鼠子宫内膜上皮层体外分离研究
为探讨新的体外分离培养新生小鼠子宫内膜上皮细胞的方法,尝试先体外分离新生小鼠子宫内膜上皮层,再从分离后的上皮层分离培养上皮细胞的技术路线,取新生3-4日龄的`小白鼠子宫角,4℃下置于1%胰蛋白酶/0.02%EDTA消化液中温和消化90 min,将巴斯德吸管的管径拉成等于或略小于子宫角直径大小,采用吹打的方法机械分离小鼠子宫内膜上皮层与基质层.结果表明:采用胰蛋白酶温和消化子宫角结合机械分离法可成功体外分离新生小鼠子宫角的子宫内膜上皮层,使先体外分离新生小鼠子宫内膜上皮层,再从分离后的上皮层分离培养上皮细胞的技术路线成为可能.
作 者：李俊 孟祥阁 范超群 LI Jun MENG Xiang-ge FAN Chao-qun 作者单位：淮北煤炭师范学院生命科学学院,安徽,淮北,235000 刊 名：淮北煤炭师范学院学报（自然科学版） 英文刊名：JOURNAL OF HUAIBEI COAL INDUSTRY TEACHERS COLLEGE(NATURAL SCIENCE) 年，卷(期)： 30(3) 分类号：Q253 关键词：新生小鼠 子宫内膜 上皮 分离篇5：骨髓单个核细胞的提取、分离、标记和体外培养
骨髓单个核细胞的提取、分离、标记和体外培养
目的 提取分离骨髓单个核细胞(BM-MNCs).方法 无菌条件下行髂后上嵴穿刺抽取小型猪骨髓20～40 ml,采用Ficoll密度梯度离心法分离BM-MNCs.结果 经2%台盼蓝鉴定细胞存活率为96%～99%,DAPI染色标记率100%,标记的'细胞核发蓝色荧光.BM-MNCs的体外培养可见细胞呈梭形生长,通过CD44免疫组化鉴定证实为CD44+骨髓间充质干细胞(MSCs).结论 BM-MNCs易分离,操作简便,可作为移植细胞选择.
作 者：孙林 周旭 章体玲 张戈 左明鲜 李劲松 黄桂琴 陆地 光雪峰 杨达宽 作者单位：孙林,周旭,张戈,杨达宽(昆明医学院第二附属医院心血管内科,云南省冠心病基础研究室,云南省,650101)章体玲,左明鲜,光雪峰(昆明市延安医院)
李劲松(云南省第二人民医院心脏中心外科)
黄桂琴,陆地(昆明医学院神经科学研究所)
刊 名：中国心血管病研究杂志 英文刊名：CHINESE JOURNAL OF CARDIOVASCULAR REVIEW 年，卷(期)： 6(10) 分类号：Q95-33 R54 关键词：骨髓单个核细胞 猪篇6：克服小鼠早期胚胎体外培养发育阻滞的研究
克服小鼠早期胚胎体外培养发育阻滞的研究
为探讨不同培养基及共培养对克服小鼠早期胚胎体外发育阻滞的影响,用不同成分组成的5种常用培养液对小鼠早期胚胎进行体外培养,后以KSOM作为基础培养基,KSOMFBS为对照,分别与小鼠输卵管上皮细胞(MOEC)和卵丘细胞(CC)进行共培养,观察从2细胞发育到4细胞的胚胎数和囊胚数的`变化.结果发现5种培养液中从2-细胞发育到4-细胞的胚胎率为30.5%～43.5%,差异不显著.KSOM 组囊胚率为40.9%,显著高于其他各组(27.9%～30.0%).共培养后,各组中克服发育阻滞的胚胎数和囊胚数均有显著提高,其中添加胎牛血清组4细胞胚胎数和囊胚数显著高于不添加组,输卵管上皮细胞组显著高于卵丘细胞组.结果显示共培养对克服小鼠2-细胞发育阻滞作用明显,添加胎牛血清效果明显好于不添加,输卵管上皮细胞共培养效果好于卵丘细胞.
作 者：山灵 王勇胜 高立功 丛银峰 张涌 SHAN Ling WANG Yong-sheng GAO Li-gong CONG Yin-feng ZHANG Yong 作者单位：西北农林科技大学生物工程研究所,陕西杨凌,712100 刊 名：西北农业学报 ISTIC PKU英文刊名：ACTA AGRICULTURAE BOREALI-OCCIDENTALIS SINICA 年，卷(期)： 15(6) 分类号：Q954.4 关键词：小鼠 早期胚胎 体外培养 发育阻滞篇7：长江江豚脐静脉细胞体外培养的初步研究
长江江豚脐静脉细胞体外培养的初步研究
长江江豚(Neophocaena phocaenoides asiaeorienmlis)属齿鲸亚目鼠海豚科.是世界上唯一的'江豚(Neophocaena phocaenoides)淡水亚种.主要分布于我国长江中下游干流和洞庭湖、鄱阳湖及其部分支流~([1-3]).
作 者：王京真 姬伟 肖武汉 王丁 WANG Jing-Zhen JI Wei XIAO Wu-Han WANG Ding 作者单位：王京真,姬伟,WANG Jing-Zhen,JI Wei(中国科学院水生生物研究所,武汉,430072;中国科学院研究生院,北京,100049)肖武汉,王丁,XIAO Wu-Han,WANG Ding(中国科学院水生生物研究所,武汉,430072)
刊 名：水生生物学报 ISTIC PKU英文刊名：ACTA HYDROBIOLOGICA SINICA 年，卷(期)： 34(2) 分类号：Q813.1~+3 关键词：江豚 体外培养 成纤维细胞 胎盘 Finless porpoise Culture in vitro Fibroblast cell Placenta篇8：山羊毛囊干细胞分离培养方法研究
山羊毛囊干细胞分离培养方法研究
分别采用组织块法和酶消化法分离培养山羊毛囊干细胞,并通过形态学观察、免疫组化染色以及克隆形成率来比较2种方法体外分离培养毛囊干细胞的效率.组织块法获得的细胞第1、3、7代K19阳性率分别为52.0%±1.62%、68.4%±1.82%、72.0%±2.42%,mtegrin-β1分别为52.5%±2.12%、66.3%±1.98%、73.0%±2.16%,而消化法获得的`细胞第1、3、7代K19阳性率分别为56.2%±3.12%、61.7%±1.17%、64.0%±3.02%,integrin-β1分别为56.0%±1.12%、63.0%±1.12%、68.0%±2.32%;组织块法获得的细胞第1、3、7代克隆形成率分别为18.4%±0.77%、31.3%±0.88%、44.7%±1.03%,而消化法获得细胞第1、3、7代克隆形成率为22.6%±2.30%、26.9%±0.86%、32.8%±1.05%;在同样培养条件下,组织块法获得的细胞可体外传19代,而消化法可传12代.结果表明两种方法均能分离得到毛囊干细胞并进行传代,但随着传代次数的增加,组织块法获得的细胞免疫组化染色阳性率、克隆形成率以及传代能力均显著高于酶消化法获得的细胞(P＜0.01).
作 者：史明艳 杨学义 窦忠英 SHI Ming-yan YANG Xue-yi Dou Zhong-ying 作者单位：西北农林科技大学国家干细胞工程技术研究中心陕西分中心,杨凌,712100 刊 名：畜牧兽医学报 ISTIC PKU英文刊名：ACTA VETERINARIA ET ZOOTECHNICA SINICA 年，卷(期)： 37(5) 分类号：Q813 关键词：山羊 毛囊干细胞 组织块 酶消化 克隆形成率篇9：组织工程化尿路细胞-支架复合体的制备及其体外培养的初步研究
组织工程化尿路细胞-支架复合体的制备及其体外培养的初步研究
目的 利用组织工程方法在体外构建尿路细胞-支架复合体.方法 采用角朊细胞培养基用组织块法获得人尿路上皮细胞(UEC)和泌尿平滑肌细胞(USMC),以免疫荧光鉴定.制备胶原材料支架,以扫描电镜评价.经过体外培养和扩增后,将P3代UEC和USMC接种在胶原支架上.结果 胶原支架上的`UEC和USMC经过体外培养1周后即可形成沿基膜排列的复层上皮结构.扫描电镜显示细胞-材料复合良好,免疫组化检测支架上的UEC和USMC的广谱角蛋白表达阳性.结论 运用组织工程方法能够在体外快速进行尿路复合细胞支架的初步构建,为进一步临床修复尿道缺损奠定技术基础.
作 者：李静 顾汉卿 LI Jing GU Han-qing 作者单位：天津市第一中心医院,天津,300192 刊 名：透析与人工器官 英文刊名：CHINESE JOURNAL OF DIALYSIS AND ARTIFICIAL ORGANS 年，卷(期)：2009 20(1) 分类号：Q813.1+1 关键词：组织工程化 尿路细胞-支架复合体 尿路上皮细胞 泌尿平滑肌细胞 胶原支架 体外培养★ 培养宝宝的方法
体外分离培养小鼠胃Cajal间质细胞的实验方法研究（精选9篇）
