【导语】“仅有淤积”通过精心收集，向本站投稿了6篇GST-AEP融合蛋白的表达、纯化和鉴定，下面是小编为大家整理后的GST-AEP融合蛋白的表达、纯化和鉴定，仅供大家参考借鉴，希望大家喜欢!
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篇1：GST-AEP融合蛋白的表达、纯化和鉴定
GST-AEP融合蛋白的表达、纯化和鉴定
目的 利用GST融合基因表达系统表达GST-AEP融合蛋白,并进行纯化及鉴定.方法 IPTG诱导重组质粒pGEX-4T-1/AEP在大肠杆菌B121(DE3)中表达,溶菌酶裂解后,采用GST蛋白纯化系统进行纯化,所得产物进行12%SDS-PAGE及Western blot鉴定.结果 大肠杆菌经诱导,高效表达出相对分子质量约34 000的蛋白,与GST-AEP融合蛋白相符.Western blot结果显示该蛋白能够被兔抗GST多克隆抗体识别.结论 已成功表达并纯化了融合蛋白,为更深入研究AEP的`结构和功能奠定了基础.
作 者：高碧峰 王宗仁 卓鹏展 张德安 肖茜 作者单位：高碧峰,王宗仁,张德安,肖茜(第四军医大学附属西京医院中医科,西安,710032)卓鹏展(西安铁路医院内一科,西安,710004)
刊 名：中国生物制品学杂志 ISTIC英文刊名：CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS 年，卷(期)：2007 20(7) 分类号：Q786 关键词：抗癫痫肽 谷胱甘肽 融合蛋白 表达 纯化篇2：GST-talin1融合蛋白的原核表达及纯化
GST-talin1融合蛋白的原核表达及纯化
应用PCR方法扩增talin1的cDNA,并将其重组入谷胱甘肽转硫酶融合基因表达载体pGEX-4T-1中,获取人源的'GST-talin1融合蛋白,为下阶段深入的研究talin1的结构、功能、及其与之相互作用的蛋白打下基础.经酶切、序列鉴定,选择正确重组子,将其质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,用Glutathione Sepharose 4B柱纯化,western blot鉴定.克隆得到了一个2400bp的talin1的cDNA片断,重组质粒目的DNA测序正确,纯化出分子量约为121.6kD的融合蛋白.用基因工程方法使GST-talin1重组质粒在原核细胞表达并成功纯化出GST-talin1融合蛋白.
作 者：吴爽 耿建国 WU Shuang GENG Jian-guo 作者单位：吴爽,WU Shuang(广东药学院基础学院组织胚胎教研室,广州,510006;中科院生化细胞研究所分子细胞生物学实验室,上海,200031)耿建国,GENG Jian-guo(中科院生化细胞研究所分子细胞生物学实验室,上海,200031)
刊 名：生物学杂志 ISTIC英文刊名：JOURNAL OF BIOLOGY 年，卷(期)：2008 25(3) 分类号：Q51 关键词：talin P-选凝素 GST-融合蛋白 亲和层析篇3：重组融合蛋白GX1-rmhTNFα的克隆、表达及鉴定
重组融合蛋白GX1-rmhTNFα的克隆、表达及鉴定
目的:构建胃癌新生血管导向性肽GX1与新型人肿瘤坏死因子(GX1-rmhTNF)基因的'原核表达载体,表达GX1-rmhTNF蛋白.方法:利用基因工程方法将胃癌血管特异性结合肽融合在新型人肿瘤坏死因子α的氨基末端,构建GX1-rmhTNF原核表达载体,在大肠杆菌进行表达.对表达产物进行SDS-PAGE电泳分析和Western blot检测分析.结果:成功构建了GX1-rmhTNF重组融合表达质粒,表达的蛋白经SDS-PAGE电泳分析,在相对分子质量(Mr)约18 000处出现了1条新生的蛋白条带,该表达蛋白具有与TNFα单克隆抗体特异性的结合能力.结论:成功构建了GX1-rmhT-NF基因的原核表达载体并在原核细胞中表达了该产物,为下一步GX1-rmhTNF的纯化奠定了基础.
作 者：曹珊珊 吴开春 颜真 万一 韩宇 赵丽娜 樊代明 CAO Shan-shan WU Kai-chun YAN Zhen WAN Yi HAN Yu ZHAO Li-na FAN Dai-ming 作者单位：第四军医大学西京医院消化内科,肿瘤生物学国家重点实验室,陕西,西安,710032 刊 名：细胞与分子免疫学杂志 ISTIC PKU英文刊名：CHINESE JOURNAL OF CELLULAR AND MOLECULAR IMMUNOLOGY 年，卷(期)：2006 22(3) 分类号：Q78 关键词：噬菌体肽段CGNSNPKSC/GX1 GX1-rmhTNFα 重组融合蛋白/表达 温度诱导篇4：牛SRY蛋白表达纯化与体外功能鉴定
牛SRY蛋白表达纯化与体外功能鉴定
利用PCR技术从北京黑白花奶牛(Bos taurus)的基因组DNA中克隆了SRY(Sex-determining region on the Y chromosome)基因编码区全长序列.序列分析表明牛SRY基因的HMG区(High mobility group)呈现高度的保守性,与人、小鼠、猪等的相似性达到70%.将SRY基因与pET-28a(+)载体相连,构建表达载体pET-28a/SRY;把该表达载体转入大肠杆菌BL21(DE3),以IPTG诱导30℃诱导4 h,SRY蛋白可高效表达,表达产物占总蛋白量的26%.对表达产物进行了Western-blotting检测,并采用亲和层析技术获得了高纯度的`牛SRY蛋白.通过PCR技术分别获得牛、人、鼠的苗勒氏管抑制物(Mullerian Inhibiting substances,MIS)启动子,凝胶阻滞试验证明,牛SRY蛋白可与人及牛的MIS启动子结合,但与鼠的Mis启动子不发生相互作用[动物学报52(6):1082-1087,2006].
作 者：裴杰 杜卫华 刘小林 柳向军 朱化彬 赵金红 林秀坤 PEI Jie DU Wei-Hua LIU Xiao-Lin LIU Xiang-Jun ZHU Hua-Bin ZHAO Jin-Hong LIN Xiu-Kun 作者单位：裴杰,刘小林,柳向军,PEI Jie,LIU Xiao-Lin,LIU Xiang-Jun(西北农林科技大学动物科技学院,陕西,杨凌,712100)杜卫华,朱化彬,林秀坤,DU Wei-Hua,ZHU Hua-Bin,LIN Xiu-Kun(中国农业科学院畜牧研究所,北京,100094)
赵金红,ZHAO Jin-Hong(内蒙古农业大学动物科学与医学学院,呼和浩特,010018)
刊 名：动物学报 ISTIC PKU英文刊名：ACTA ZOOLOGICA SINICA 年，卷(期)：2006 52(6) 分类号：Q95 关键词：SRY基因 表达纯化 奶牛 Mis启动子篇5：脂多糖应激新分子融合蛋白的高表达及纯化
脂多糖应激新分子融合蛋白的高表达及纯化
目的 在原核表达系统中表达脂多糖应激新分子编码的蛋白质.方法 PCR扩增Hlrg Cdna编码区,克隆入表达载体pcTAT中,构建成融合6His的`表达载体pcTAT-lrg,转化E.coli BL21(DE3),以IPTG诱导.表达产物用SDS-PAGE及凝胶光密度扫描分析,用Ni-NTA亲和层析柱纯化.结果 经过IPTG诱导4 h,表达出相对分子质量(Mr)约25 000的蛋白,占菌体总蛋白的51%.表达产物为可溶性的,用Ni-NTA亲和层析柱纯化的表达蛋白达到电泳纯.加入培养液中的纯化蛋白,可在30 min内进入HEK293细胞.结论 在E.coli中成功地高表达人Lrg融合蛋白,并对其进行初步纯化,为人Lrg功能的研究打下基础.
作 者：杜可军 常文辉 侯立朝 骆文静 刘承利 陈苏民 陈景元 柴玉波 DU Ke-jun CHANG Wen-hui HOU Li-chao LUO Wen-jing LIU Cheng-li CHEN Su-min CHEN Jing-yuan CHAI Yu-bo 作者单位：杜可军,骆文静,陈景元,DU Ke-jun,LUO Wen-jing,CHEN Jing-yuan(第四军医大学劳动与环境卫生学教研室,陕西,西安,710032)常文辉,CHANG Wen-hui(陕西省疾控中心)
侯立朝,HOU Li-chao(第四军医大学西京医院,麻醉科)
刘承利,陈苏民,柴玉波,LIU Cheng-li,CHEN Su-min,CHAI Yu-bo(第四军医大学生物化学与分子生物学教研室)
刊 名：毒理学杂志 ISTIC PKU英文刊名：JOURNAL OF TOXICOLOGY 年，卷(期)：2006 20(5) 分类号：Q271 关键词：脂多糖应激新分子 蛋白融合表达 克隆 纯化篇6：sTNFR Ⅱ和VIP融合蛋白的基因克隆表达、纯化及活性检测
sTNFR Ⅱ和VIP融合蛋白的基因克隆表达、纯化及活性检测
可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅱ(sTNFRⅡ)和血管活性肠肽(VIP)对类风湿性关节炎(RA)均有治疗作用,但两者的作用机制不同.制备两者融合蛋白,可能具有更好的防治类风湿关节炎的`作用.用含有VIP基因序列的上游引物和sTNFRⅡ的下游引物,用PCR扩增出由连接序列将VIP和sTNFRⅡ基因连接的片段,再亚克隆到原核表达载体pET32a,在大肠杆菌DH5α内诱导表达.表达的产物经离子交换、疏水层析纯化,并用体外中和试验检测其抑制TNF细胞毒及肝细胞膜特异性脂蛋白(Lsp)诱导的细胞毒生物活性.结果显示构建的pET32a-VIP-sTNFRⅡ表达载体在大肠杆菌DH5α内以包涵体形式表达,疏水层析结合离子交换层析纯化后,融合蛋白具有较好的抑制炎症分子诱导的炎症反应生物活性,为将来应用打下基础.
作 者：王虹 曾位森 陈金华 王珊珊 刘丹 杨艳妮 陈百宏 李玲 WANG Hong ZENG Wei-sen CHEN Jin-hua WANG Shan-shan LIU Dan YANG Yan-ni CHEN Bai-hong Li Ling 作者单位：广州蓝星生物科技开发有限公司,广州,510663 刊 名：中国生物工程杂志 ISTIC PKU英文刊名：CHINA BIOTECHNOLOGY 年，卷(期)：2006 26(5) 分类号：Q78 关键词：sTNFRⅡ VIP 融合蛋白 表达 纯化★ 融合教育心得体会
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GST-AEP融合蛋白的表达、纯化和鉴定（精选6篇）
